为了探讨线粒体ATP敏感钾通道(mitochondrial ATP-sensitive K信号转导中的作用以及对缺氧肺动脉平滑肌细胞中细胞色素C在细胞内的分布及细胞增殖的影响,本实验将人肺动脉平滑肌细胞进行常氧或24 h缺氧培养,并将标本分为六组:(1)对照组;(2)mitoKATP开放剂diazoxide组;(3)mitoKATP阻断剂5-HD组;(4)24 h缺氧组;(5)24 h缺氧+diazoxide组;(6)24 h缺氧+5-HD组.利用激光共聚焦显微镜成像法检测△ψm;线粒体/胞浆成分分离试剂盒(BioVision)分离线粒体和胞浆成分后,Western blot检测两者细胞色素C;Western blot检测细胞中caspase-9的蛋白表达量;MTT法及PI染色后流式细胞仪检测细胞增殖情况.结果显示:(1)diazoxide作用24 h后,R-123荧光明显增强,胞浆细胞色素C与线粒体细胞色素C的比值明显降低,caspase-9的蛋白表达显著减少,细胞增殖明显增多、凋亡减少,与正常对照组相比较,均P＜0.05;而5-HD作用24 h与正常对照组比较,上述指标无明显变化(P＞0.05).(2)缺氧24 h组,结果与diazoxide组相似,R-123荧光明显增强,胞浆细胞色素C与线粒体细胞色素C的比值明显降低,caspase-9的蛋白表达显著减少,细胞增殖明显增多、凋亡减少,与正常对照组相比较,均P＜0.05;24 h缺氧+diazoxide组与缺氧组相比较,R-123荧光明显增强,胞浆细胞色素

作者：胡红玲；张珍祥；赵建平；汪涛；徐永健

来源：生理学报 2006 年 58卷 3期