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以基因表达谱芯片对Ty21a免疫前后小鼠肠细胞(包括肠粘膜上皮细胞和肠上皮间淋巴细胞)基因表达的差异性进行研究比较.将490条经抑制消减杂交法筛选出的与小鼠Ty21a免疫相关的cDNA制备成表达谱芯片;利用免疫前后小鼠肠细胞的mRNA通过逆转录方法,将Cy3和Cy5两种荧光分别标记到两种组织的cDNA上,制备成cDNA探针,并与表达谱芯片进行杂交及扫描,单点重复2次实验,通过计算机数据处理判定基因是否在上述两种细胞群中有表达差异.筛选出差异表达基因共98条,其中92条为表达上调基因,6条为表达降低基因.提示,基因表达谱芯片技术是高通量进行基因表达模式研究的方法,可同时定量研究大量的基因表达水平,从而鉴定可能参与免疫的基因.

作者:王华;高杰英;周洁;李海民

来源:上海免疫学杂志 2002 年 22卷 1期

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作者:
王华;高杰英;周洁;李海民
来源:
上海免疫学杂志 2002 年 22卷 1期
标签:
微矩阵基因芯片 基因表达谱 Ty21a 肠细胞 免疫
以基因表达谱芯片对Ty21a免疫前后小鼠肠细胞(包括肠粘膜上皮细胞和肠上皮间淋巴细胞)基因表达的差异性进行研究比较.将490条经抑制消减杂交法筛选出的与小鼠Ty21a免疫相关的cDNA制备成表达谱芯片;利用免疫前后小鼠肠细胞的mRNA通过逆转录方法,将Cy3和Cy5两种荧光分别标记到两种组织的cDNA上,制备成cDNA探针,并与表达谱芯片进行杂交及扫描,单点重复2次实验,通过计算机数据处理判定基因是否在上述两种细胞群中有表达差异.筛选出差异表达基因共98条,其中92条为表达上调基因,6条为表达降低基因.提示,基因表达谱芯片技术是高通量进行基因表达模式研究的方法,可同时定量研究大量的基因表达水平,从而鉴定可能参与免疫的基因.