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根据弓形虫P30基因序列设计二对引物分别进行了PCR一次扩增和套式扩增,结果这两对引物在一次扩增和套式扩增中分别出现预期的扩增片段914bp、522bp和522bp;套式扩增出现的条带比一次扩增出现的条带亮度明显增强.提示套式扩增比一次扩增具有更高的敏感性.用外引物进行扩增后,最低可以检测到1pg的弓形虫DNA.说明所建立的反应体系具有高度的敏感性.用内引物对人工感染弓形虫的ICR小鼠血液、组织进行弓形虫DNA的检测,结果均扩增出522bp的扩增带.根据B1基因序列设计的引物进行PCR一次扩增和半套式扩增.结果均出现预期的扩增片段619bp、362bp和362bp;用半套式扩增检测感染弓形虫的ICR小鼠血液、组织时可扩增出522bp的扩增带,半套式扩增比一次扩增更敏感.

作者:王胜昌;谢建云;邵伟娟;高诚

来源:上海实验动物科学 2003 年 23卷 1期

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王胜昌;谢建云;邵伟娟;高诚
来源:
上海实验动物科学 2003 年 23卷 1期
标签:
弓形虫 一次PCR 套式PCR 半套式PCR ICR小鼠
根据弓形虫P30基因序列设计二对引物分别进行了PCR一次扩增和套式扩增,结果这两对引物在一次扩增和套式扩增中分别出现预期的扩增片段914bp、522bp和522bp;套式扩增出现的条带比一次扩增出现的条带亮度明显增强.提示套式扩增比一次扩增具有更高的敏感性.用外引物进行扩增后,最低可以检测到1pg的弓形虫DNA.说明所建立的反应体系具有高度的敏感性.用内引物对人工感染弓形虫的ICR小鼠血液、组织进行弓形虫DNA的检测,结果均扩增出522bp的扩增带.根据B1基因序列设计的引物进行PCR一次扩增和半套式扩增.结果均出现预期的扩增片段619bp、362bp和362bp;用半套式扩增检测感染弓形虫的ICR小鼠血液、组织时可扩增出522bp的扩增带,半套式扩增比一次扩增更敏感.