目的 建立小鼠肝炎病毒(MHV)双抗体夹心ELISA检测方法.方法 将4株特异性抗MHVN蛋白的单克隆抗体进行抗体配对试验确定3D4H9为捕获抗体,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的4G9F2为检测抗体;通过方阵试验确定了3D4H9和4G9F2-HRP的最佳工作浓度分别为12.8 ng/mL和70.84 ng/mL,以P/N>2,同时D450nm≥0.248作为阳性临界值的判定.结果 该ELISA方法重复性变异系数小于10%,与小鼠细小病毒、仙台病毒、小鼠肺炎病毒、呼肠孤病毒3型等无交叉反应,对358份血清样品进行检测,与美国EBI公司的间接ELISA试剂盒检测结果无明显差异.结论 本研究建立的双抗体夹心ELISA方法检测MHV具有较高的特异性和敏感性,可以用于MHV的病原学检测.
作者:周洁;高诚;胡建华
来源:实验动物与比较医学 2015 年 35卷 1期