目的探讨缺氧诱导因1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)在人肾微血管内皮细胞(human renal microvascular endothelial cells,RMVEC)低温缺氧再复氧(hypoxia/reoxygenation,HR)损伤中的抗凋亡作用.方法建立RMVEC低温HR模型,应用3,4-DHB和NS-398预处理细胞,设对照、低温HR、3,4-DHB和NS398共4组.采用RT-PCR和Western blot检测各组HIF-1α和血红素加氧酶1(heme oxygenases-1,HO-1)mRNA和蛋白的表达水平;通过TUNEL法及活化caspase-3蛋白表达水平检测各组细胞凋亡情况.结果各组间HIF-1αmRNA表达水平无统计学差异(P>0.05);经低温HR损伤后HIF-1α蛋白(P<0.001)、HO-1 mRNA(P<0.001)和HO-1蛋白(P=0.002)表达水平与对照组比较显著增高.与低温HR组比较,3,4-DHB组HIF-1α(P<0.001)、HO-1 mRNA(P=0.03)和蛋白(P=0.017)表达水平有显著增高;而NS-398组HIF-1α(P=0.036)、HO-1 mRNA(P=0.007)和蛋白(P=0.005)表达水平则显著减低.低温HR损伤造成活化caspase-3表达显著增高(P=0.001).与低温HR组比较,3,4-DHB组表达减低(P=0.005)和NS-398组表达增高(P<0.001)均有统计学意义.TUNEL结果,与对照组[(6.97±0.032)
作者:陈波;赵鸿;郑景存;王翔;瞿连喜;丁强;张元芳
来源:复旦学报(医学版) 2005 年 32卷 6期