目的 筛选具有腹膜后高淋巴结转移能力的浆液性卵巢癌细胞株,并分析其导致淋巴高转移的相关小RNA(microRNA,miRNAs).方法 接种人卵巢癌细胞株SKOV-3于BALB/c裸鼠腹腔,从腹膜后淋巴结中筛选出卵巢癌细胞,再次接种于裸鼠腹腔,重复分选4次后获得了稳定的高腹膜后淋巴结转移细胞株SKOV-3/LN403.对比SKOV-3和SKOV-3/LN403细胞的形态、增殖和侵袭能力,应用miRCURYTM LNA Array技术对两者的miRNA进行差异分析,通过real-time PCR验证差异表达的miRNAs.结果 稳定筛选的腹膜后高淋巴结转移卵巢癌细胞株SKOV-3/LN403,淋巴转移率高达90%(n=10),并能成功模拟卵巢癌淋巴转移患者的临床表现.SKOV-3/LN403具有比SKOV-3更强的增殖(P<0.05)和侵袭能力(P<0.01).miRNA的表达谱提示14种miRNA表达差异明显,包括3种miRNA上调(hsa-miR-886 5p,hsa miR-640,hsa-miR-801),11种miRNA下调(hsa let 7a,hsa-miR-30a,hsa-miR 491-3p,hsa-let-7i,hsa-miR-125b 1,hsa-miR-27a,hsa-miR-24,hsalet-7b,hsa-miR-16,hsa-miR 20a,hsa-miR-26b).Real time PCR结果和芯片结果一致.结论 SKOV-3/LN403可用于构建卵巢癌腹膜后淋巴结转移模型,其高腹膜后淋巴结转移力与miRNA分子的调控相关,为卵巢癌腹膜后淋巴结转移机制提供潜在研究靶点.
作者:杨梅琳;康玉;洪珊珊;罗建民;徐丛剑
来源:复旦学报(医学版) 2014 年 41卷 4期