目的 研究miR-132在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞系H1299中的作用及相应的靶基因.方法 real-time PCR检测7种细胞系中miR-132的表达量.用CCK-8检测稳定株细胞H1299-pEGP-miR-132与H1299-pEGP-miR-null的生长速率的变化.使用稳定株细胞H1299检测miR-132对于细胞克隆形成、细胞迁移和细胞侵袭的影响.用Transwell结合matrigel的方法检测H1299-pEGP-miR-132细胞与H 1299-pEGP-miR-null细胞在72 h时细胞迁移和侵袭的变化,同时在H1299-pEGP-miR-132细胞中使用anti-miR-132进行了相关的实验验证.运用生物信息学方法预测miR-132的靶基因,并运用双荧光实验、real-time PCR和Western blot验证.在H1299-pEGP-miR-132细胞中共同转染anti-miR-132和PTCH1 siRNA检测其对细胞的增殖、迁移和侵袭的影响.结果 miR-132在肺癌细胞系中呈现高表达,在NSCLC细胞H1299中miR-132通过靶向调节PTCH1基因的表达发挥作用.H1299-pEGP-miR-132细胞的增殖(P＜0.01)、迁移(P＜0.05)、侵袭(P＜0.05)能力明显高于对照组.在H1299-pEGP-miR-132细胞中转入PTCH1 siRNA后细胞增殖能力升高(P＜0.05),迁移和侵袭能力降低(P＜0.001).H1299-pEGP-miR-132细胞15天形成的克隆数目是对照组细胞的1.41倍(P＜0.05).Western blot法

作者：杨秀方；褚凯丽；李媛；李瑶；黄燕

来源：复旦学报（医学版） 2015 年 42卷 3期