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目的探讨5-脂氧合酶(5-LO)在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中的表达.方法分离大鼠腹腔巨噬细胞培养一定时间,用高效液相色谱、Western blot和RT-PCR分别观察5-LO催化的代谢产物的生物合成、5-LO和5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)表达的变化,并用毛细管电泳定量分析RT-PCR产物.结果体外培养24 h对5-LO以及FLAP的表达没有明显影响,5-LO酶活性没有明显的变化;培养到第72小时,5-LO mRNA和蛋白表达没有明显的影响,但FLAP几乎检测不到,mRNA的量明显降低,检测不到白三烯B4(LTB4)和5-羟二十碳四烯酸(5-HETE).进一步培养到第120小时,5-LO的mRNA和蛋白表达明显下降,FLAP的mRNA和蛋白检测不到.毛细管电泳定量分析结果显示,培养1、24和72 h,5-LO的相对表达量没有明显变化,培养到120 h则下降了约80

作者:李杰萍;梁统;周克元

来源:检验医学 2004 年 19卷 3期

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作者:
李杰萍;梁统;周克元
来源:
检验医学 2004 年 19卷 3期
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5-脂氧合酶 5-脂氧合酶激活蛋白 腹腔巨噬细胞 毛细管电泳 基因表达
目的探讨5-脂氧合酶(5-LO)在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中的表达.方法分离大鼠腹腔巨噬细胞培养一定时间,用高效液相色谱、Western blot和RT-PCR分别观察5-LO催化的代谢产物的生物合成、5-LO和5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)表达的变化,并用毛细管电泳定量分析RT-PCR产物.结果体外培养24 h对5-LO以及FLAP的表达没有明显影响,5-LO酶活性没有明显的变化;培养到第72小时,5-LO mRNA和蛋白表达没有明显的影响,但FLAP几乎检测不到,mRNA的量明显降低,检测不到白三烯B4(LTB4)和5-羟二十碳四烯酸(5-HETE).进一步培养到第120小时,5-LO的mRNA和蛋白表达明显下降,FLAP的mRNA和蛋白检测不到.毛细管电泳定量分析结果显示,培养1、24和72 h,5-LO的相对表达量没有明显变化,培养到120 h则下降了约80