目的 建立检测二胺氧化酶(DAO)活性的双试剂连续监测法,并进行方法学评价.方法 通过试验来确定反应特异吸收峰、最佳检测时间、合理试剂配比、最佳底物浓度和反应缓冲体系的最佳pH值及浓度等最适反应条件.利用线性范围、精密度、回收试验、干扰试验和试剂及样本稳定性来评价该方法的敏感性、准确度和抗干扰能力.检测150名健康人和30例严重烧伤合并胃肠道黏膜屏障功能障碍或衰竭患者血清DAO活性,确定参考区间和诊断准确度.结果 通过试验确定以100 mmol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl,pH值8.0)为反应缓冲体系,以3.2 mmol/L 1,4-丁二胺为最佳底物浓度,试剂Ⅰ和试剂Ⅱ按4:1与样本反应,在340 nm波长下200～300 s期间连续监测还原型辅酶Ⅰ(NADH)吸光度的下降速度计算求得DAO活性.本法线性范围为0～100 U/L,不精密度均＜5
作者：胡进访；吴雁；王白石；王旭
来源：检验医学 2013 年 28卷 8期
