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目的:探讨实际工作中不同处理方法对流式细胞术检测单核细胞-血小板聚集体( MPA)的影响,为准确检测MPA提供依据。方法获取枸橼酸钠抗凝外周静脉全血,分别以CD14-藻红蛋白( PE)、CD61-异硫氰酸荧光素( FITC)标记单核细胞、血小板,以CD62P-PE标记活化血小板,使用流式细胞术检测CD14-PE/CD61-FITC双阳性MPA占单核细胞百分比及血小板CD62P阳性率。采用不同处理方法[全血标本处理前后放置不同时间、全血固定后立即标记抗体或放置不同时间后标记抗体、抗体标记前全血离心处理、不同抗体组合(抗CD14-PE和抗CD61-FITC ,抗CD14-PE和抗CD41-ECD,抗CD45-ECD和抗CD61-FITC)]检测MPA,比较各种处理方法检测的MPA是否有差异。结果与获取标本后立即处理比较,放置于室温(18~25℃)和低温(2~8℃), MPA百分比、血小板CD62P阳性率均随放置时间的延长而增加(P<0.05),两者呈正相关(室温r=0.82,P<0.05;低温r=0.83,P<0.05)。标本处理后立即检测或低温保存放置至24 h再检测, MPA百分率差异无统计学意义(P>0.05)。与固定前标记抗体的处理方法比较,1%多聚甲醛低温固定全血标本后标记抗体,或者低温保存放置至24 h再标记抗体,MPA百分率差异无统计学意义(P>0.05)。全血标本离心

作者:李琳芸;梅冰;王昌富

来源:检验医学 2015 年 9期

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作者:
李琳芸;梅冰;王昌富
来源:
检验医学 2015 年 9期
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单核细胞-血小板聚集体 流式细胞术 处理方法 Monocyte-platelet aggregation Flow cytometry Processing
目的:探讨实际工作中不同处理方法对流式细胞术检测单核细胞-血小板聚集体( MPA)的影响,为准确检测MPA提供依据。方法获取枸橼酸钠抗凝外周静脉全血,分别以CD14-藻红蛋白( PE)、CD61-异硫氰酸荧光素( FITC)标记单核细胞、血小板,以CD62P-PE标记活化血小板,使用流式细胞术检测CD14-PE/CD61-FITC双阳性MPA占单核细胞百分比及血小板CD62P阳性率。采用不同处理方法[全血标本处理前后放置不同时间、全血固定后立即标记抗体或放置不同时间后标记抗体、抗体标记前全血离心处理、不同抗体组合(抗CD14-PE和抗CD61-FITC ,抗CD14-PE和抗CD41-ECD,抗CD45-ECD和抗CD61-FITC)]检测MPA,比较各种处理方法检测的MPA是否有差异。结果与获取标本后立即处理比较,放置于室温(18~25℃)和低温(2~8℃), MPA百分比、血小板CD62P阳性率均随放置时间的延长而增加(P<0.05),两者呈正相关(室温r=0.82,P<0.05;低温r=0.83,P<0.05)。标本处理后立即检测或低温保存放置至24 h再检测, MPA百分率差异无统计学意义(P>0.05)。与固定前标记抗体的处理方法比较,1%多聚甲醛低温固定全血标本后标记抗体,或者低温保存放置至24 h再标记抗体,MPA百分率差异无统计学意义(P>0.05)。全血标本离心