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目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)对同源框蛋白A10(HOXA10)表达的影响及其机制.方法 选取慢性乙型肝炎(CHB)患者20例(CHB组)、体检健康者23名(正常对照组),分离其外周血单个核细胞(PBMC).采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和免疫印迹法检测肝癌细胞系HepG2、HepG2.2.15及CHB组、正常对照组PBMC中HOXA10 mRNA和蛋白的表达.将HBV单个基因的表达质粒(pCMV-S、pCMV-E、pCMV-C、pCMV-X、pCMV-P)分别与含有HOXA10基因启动子的荧光素酶报告基因pGL3-HOXA10共转染HepG2细胞,并测定荧光素酶活性.结果 HepG2.2.15细胞中HOXA10 mRNA和蛋白的相对表达量均显著高于HepG2细胞(P=0.001).HBV患者PBMC中HOXA10 mRNA的相对表达量显著高于正常对照组(P=0.001).转染pCMV-X的HepG2细胞的荧光素酶活性显著高于转染对照载体pCMV-tag2B的HepG2细胞(P=0.001),转染其他质粒的HepG2细胞之间荧光素酶活性差异均无统计学意义(P>0.05).转染pCMV-X的HepG2细胞的HOXA10 mRNA和蛋白的相对表达量显著高于转染空载体pCMV-tag2B的HepG2细胞(P=0.001).结论 HBV可能通过其X基因上调HOXA10的表达.

作者:宋惠;杨兰;徐莉敏;沈振华;刘倩倩;刘兴晖

来源:检验医学 2021 年 36卷 11期

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作者:
宋惠;杨兰;徐莉敏;沈振华;刘倩倩;刘兴晖
来源:
检验医学 2021 年 36卷 11期
标签:
同源框蛋白A10;乙型肝炎病毒;X基因
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)对同源框蛋白A10(HOXA10)表达的影响及其机制.方法 选取慢性乙型肝炎(CHB)患者20例(CHB组)、体检健康者23名(正常对照组),分离其外周血单个核细胞(PBMC).采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和免疫印迹法检测肝癌细胞系HepG2、HepG2.2.15及CHB组、正常对照组PBMC中HOXA10 mRNA和蛋白的表达.将HBV单个基因的表达质粒(pCMV-S、pCMV-E、pCMV-C、pCMV-X、pCMV-P)分别与含有HOXA10基因启动子的荧光素酶报告基因pGL3-HOXA10共转染HepG2细胞,并测定荧光素酶活性.结果 HepG2.2.15细胞中HOXA10 mRNA和蛋白的相对表达量均显著高于HepG2细胞(P=0.001).HBV患者PBMC中HOXA10 mRNA的相对表达量显著高于正常对照组(P=0.001).转染pCMV-X的HepG2细胞的荧光素酶活性显著高于转染对照载体pCMV-tag2B的HepG2细胞(P=0.001),转染其他质粒的HepG2细胞之间荧光素酶活性差异均无统计学意义(P>0.05).转染pCMV-X的HepG2细胞的HOXA10 mRNA和蛋白的相对表达量显著高于转染空载体pCMV-tag2B的HepG2细胞(P=0.001).结论 HBV可能通过其X基因上调HOXA10的表达.