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目的 研究自拟益气化瘀补肾方对β-catenin信号通路的影响及其治疗膝骨关节炎的作用机制.方法 通过改良Hulth法切开小鼠右膝部内侧皮肤,切断内侧副韧带,切除内侧半月板,并切断前交叉韧带,造成小鼠膝骨关节炎模型,分为模型组和自拟益气化瘀补肾方组.假手术组单纯切开小鼠右膝部内侧皮肤.造模2个月后给予自拟益气化瘀补肾方灌胃,治疗2个月.采用Micro-CT扫描小鼠膝关节,ABH/OG染色观察小鼠膝关节软骨细胞变化,免疫组化染色观察小鼠膝关节β-catenin、MMP-13、Col X表达,RT-PCR检测Col X、MMP-9、MMP-13和OC基因表达.结果 ①Micro-CT检测发现,与假手术组比较,模型组膝关节周围骨赘形成增加,自拟益气化瘀补肾方组膝关节周围骨赘形成少于模型组.②ABH/OG染色发现,假手术组关节软骨表面光滑,表浅层、移行层、放射层和钙化层4层结构清晰可辨,软骨细胞呈柱状排列,无软骨细胞巢聚;模型组关节软骨组织表浅层细胞数量减少,移行层和放射层见到大量软骨细胞巢聚,潮线前移,出现双潮线;自拟益气化瘀补肾方组关节软骨组织形态较模型组明显改善.③β-catenin免疫组化染色结果显示,与假手术组比较,模型组关节软骨细胞β-catenin蛋白表达显著增加,自拟益气化瘀补肾方组关节软骨细胞β-catenin表达比模型组显著减少(P<0.05);

作者:熊振飞;汤样华;王乾;黄晨;辛大伟;唐德志

来源:上海中医药杂志 2021 年 55卷 9期

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作者:
熊振飞;汤样华;王乾;黄晨;辛大伟;唐德志
来源:
上海中医药杂志 2021 年 55卷 9期
标签:
膝骨关节炎;分子机制;β-catenin;益气化瘀补肾方;模型小鼠;中药研究
目的 研究自拟益气化瘀补肾方对β-catenin信号通路的影响及其治疗膝骨关节炎的作用机制.方法 通过改良Hulth法切开小鼠右膝部内侧皮肤,切断内侧副韧带,切除内侧半月板,并切断前交叉韧带,造成小鼠膝骨关节炎模型,分为模型组和自拟益气化瘀补肾方组.假手术组单纯切开小鼠右膝部内侧皮肤.造模2个月后给予自拟益气化瘀补肾方灌胃,治疗2个月.采用Micro-CT扫描小鼠膝关节,ABH/OG染色观察小鼠膝关节软骨细胞变化,免疫组化染色观察小鼠膝关节β-catenin、MMP-13、Col X表达,RT-PCR检测Col X、MMP-9、MMP-13和OC基因表达.结果 ①Micro-CT检测发现,与假手术组比较,模型组膝关节周围骨赘形成增加,自拟益气化瘀补肾方组膝关节周围骨赘形成少于模型组.②ABH/OG染色发现,假手术组关节软骨表面光滑,表浅层、移行层、放射层和钙化层4层结构清晰可辨,软骨细胞呈柱状排列,无软骨细胞巢聚;模型组关节软骨组织表浅层细胞数量减少,移行层和放射层见到大量软骨细胞巢聚,潮线前移,出现双潮线;自拟益气化瘀补肾方组关节软骨组织形态较模型组明显改善.③β-catenin免疫组化染色结果显示,与假手术组比较,模型组关节软骨细胞β-catenin蛋白表达显著增加,自拟益气化瘀补肾方组关节软骨细胞β-catenin表达比模型组显著减少(P<0.05);