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本文利用c-fos ASO(反义链全部硫代磷酸化修饰)技术阻断c-fos的表达,观察此项处理对亚硒酸钠在体外培养皮质神经细胞致凋亡作用和相关基因表达改变的影响.结果显示:(1)c-fos ASO可阻断亚硒酸钠的致凋亡作用,且有一定的剂量和时间依赖性;用琼脂糖凝胶电泳分析由各个时间点提取的DNA片段,与对照组比较,c-fos ASO能明显阻断亚硒酸钠诱导的典型的DNA梯型;用流式细胞仪检测得到的DNA含量直方图也显示,在c-fosASO处理后,与对照组比较,亚硒酸钠引起的亚二倍体峰变小;(2)用RT-PCR法检测表明,在用c-fos ASO和亚硒酸钠处理皮质神经细胞后,不仅阻断了c-fos表达的上调,对其它几种基因表达的改变也有不同的影响,与对照组比较,c-fos mRNA在各个时间点(0.5、1、2、4和24 h)不再上升,bcl-2 mRNA则不再下降,baxmRNA和AChEmRNA都不再上升;唯一不同的是,p53mRNA的变化趋势则与未经c-fos ASO预处理时基本相同,在多数时间点两组p-53mRNA水平之间无显著性差异(P>0.05),说明此基因的表达基本不受c-fos ASO作用的影响.上述结果提示,亚硒酸钠诱导的神经元凋亡可能是一组级联式基因表达更变的结果,c-fos是其中的一个组成成员,它的表达改变被阻断后,处于它下游的基因bcl-2、bax,和AChE基因表达的改变不再发生或减弱,而处于c-fos上游

作者:肖荣;窦岩;赵嘉惠;王瑞;闫秀珍;乔健天

来源:神经解剖学杂志 2002 年 18卷 2期

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肖荣;窦岩;赵嘉惠;王瑞;闫秀珍;乔健天
来源:
神经解剖学杂志 2002 年 18卷 2期
标签:
细胞凋亡 亚硒酸钠 反义寡聚核苷酸 c-fos 培养皮质神经元 新生小鼠 apoptosis sodium selenite antisense oligodeoxynucleotide c-fos cultured cortical neurons newborn mice
本文利用c-fos ASO(反义链全部硫代磷酸化修饰)技术阻断c-fos的表达,观察此项处理对亚硒酸钠在体外培养皮质神经细胞致凋亡作用和相关基因表达改变的影响.结果显示:(1)c-fos ASO可阻断亚硒酸钠的致凋亡作用,且有一定的剂量和时间依赖性;用琼脂糖凝胶电泳分析由各个时间点提取的DNA片段,与对照组比较,c-fos ASO能明显阻断亚硒酸钠诱导的典型的DNA梯型;用流式细胞仪检测得到的DNA含量直方图也显示,在c-fosASO处理后,与对照组比较,亚硒酸钠引起的亚二倍体峰变小;(2)用RT-PCR法检测表明,在用c-fos ASO和亚硒酸钠处理皮质神经细胞后,不仅阻断了c-fos表达的上调,对其它几种基因表达的改变也有不同的影响,与对照组比较,c-fos mRNA在各个时间点(0.5、1、2、4和24 h)不再上升,bcl-2 mRNA则不再下降,baxmRNA和AChEmRNA都不再上升;唯一不同的是,p53mRNA的变化趋势则与未经c-fos ASO预处理时基本相同,在多数时间点两组p-53mRNA水平之间无显著性差异(P>0.05),说明此基因的表达基本不受c-fos ASO作用的影响.上述结果提示,亚硒酸钠诱导的神经元凋亡可能是一组级联式基因表达更变的结果,c-fos是其中的一个组成成员,它的表达改变被阻断后,处于它下游的基因bcl-2、bax,和AChE基因表达的改变不再发生或减弱,而处于c-fos上游