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目的:观察转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)对缺氧诱导的神经干细胞(neural stem cells,NSCs)损伤是否具有保护作用.方法:取新生1d的大鼠大脑皮质,进行NSCs的分离、培养、传代、诱导分化和鉴定.以三气培养箱(94%N2、5%CO2、1%O2)制备NSCs的缺氧损伤模型.取传代细胞,随机分为4组:正常对照组、三气缺氧组、溶剂对照组、生长因子组.各组细胞在相应时间点用Hoechst33258进行荧光染色,镜下观察、拍照,计算Hoechst染色阳性细胞率,评估三气培养对NSCs的损伤情况以及TGF-β1对这种损伤的保护作用.结果:在未诱导分化前,传代培养的细胞呈Nestin免疫反应阳性;用胎牛血清(fetal bovie serum,FBS)诱导分化后则分别呈Ⅲ型β-微管蛋白(type Ⅲ beta tubulin,Ⅲ β-tubulin)和胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)免疫反应阳性,表明分离到的细胞是神经干细胞.Hoechst33258染色显示,凋亡细胞呈强亮蓝色荧光;正常细胞弥漫均匀着色,无强荧光.与正常对照组相比,三气缺氧组的凋亡阳性细胞显著增多(P<0.05).与三气缺氧组或溶剂对照组相比,生长因子组的Hoechst33258染色凋亡阳性细胞数显著减少(P<0.05),但仍明显多于正常对照组(P<0.05).结论:TGF-β1能够显著减少三气培养法

作者:钱冰;赵小芳;吕春娥;于娜;韩冰;高殿帅;刘志安

来源:神经解剖学杂志 2015 年 31卷 2期

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作者:
钱冰;赵小芳;吕春娥;于娜;韩冰;高殿帅;刘志安
来源:
神经解剖学杂志 2015 年 31卷 2期
标签:
神经干细胞 缺氧 细胞凋亡 转化生长因子β1 大脑皮质 大鼠 neural stem cells hypoxia apoptosis transforming growth factor beta 1 cerebral cortex rat
目的:观察转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)对缺氧诱导的神经干细胞(neural stem cells,NSCs)损伤是否具有保护作用.方法:取新生1d的大鼠大脑皮质,进行NSCs的分离、培养、传代、诱导分化和鉴定.以三气培养箱(94%N2、5%CO2、1%O2)制备NSCs的缺氧损伤模型.取传代细胞,随机分为4组:正常对照组、三气缺氧组、溶剂对照组、生长因子组.各组细胞在相应时间点用Hoechst33258进行荧光染色,镜下观察、拍照,计算Hoechst染色阳性细胞率,评估三气培养对NSCs的损伤情况以及TGF-β1对这种损伤的保护作用.结果:在未诱导分化前,传代培养的细胞呈Nestin免疫反应阳性;用胎牛血清(fetal bovie serum,FBS)诱导分化后则分别呈Ⅲ型β-微管蛋白(type Ⅲ beta tubulin,Ⅲ β-tubulin)和胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)免疫反应阳性,表明分离到的细胞是神经干细胞.Hoechst33258染色显示,凋亡细胞呈强亮蓝色荧光;正常细胞弥漫均匀着色,无强荧光.与正常对照组相比,三气缺氧组的凋亡阳性细胞显著增多(P<0.05).与三气缺氧组或溶剂对照组相比,生长因子组的Hoechst33258染色凋亡阳性细胞数显著减少(P<0.05),但仍明显多于正常对照组(P<0.05).结论:TGF-β1能够显著减少三气培养法