目的:对原有少突胶质细胞祖细胞培养与分离纯化方法进行改进,以简单、高效获得少突胶质细胞并建立少突胶质细胞糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)模型.方法:取SD乳鼠脑皮质,采用两种不同的细胞增殖法和两种不同的分离纯化法分四组培养,分别为细胞因子增殖联合摇床震荡分离纯化法组,B104CM增殖联合摇床震荡分离纯化法组,细胞因子增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法组,B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法组.倒置显微镜下观察神经细胞形态学变化并进行细胞计数.A2B5和髓鞘碱性蛋白鉴定少突胶质细胞并分析其纯度.纯化后的少突胶质细胞祖细胞分化培养3d后分四组培养,正常组正常培养,低氧组分三组,换无糖DMEM培养基,OGD 1、2、3h.然后采用MTT比色法检测细胞活力;流式细胞术分析细胞的凋亡率.结果:(1) B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法较其他3种培养方法收获的少突胶质细胞祖细胞数量多(P＜0.05).(2) A2B5和MBP特异性标记,细胞纯度可达到95％.(3) MTT结果显示:OGD 1 h少突胶质细胞的细胞活力即降低(P＜0.05),随着缺氧时间延长细胞活力呈降低的趋势更加明显(P＜0.05).(4)流式细胞测细胞凋亡的结果显示:OGD 1 h、2h、3h,细胞的凋亡率分别为14.43％±0.20％,21.99％±0.42％和44.71％ ±0
作者：孟赞；唐勇；彭彦
来源：神经解剖学杂志 2016 年 32卷 5期
