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目的:研究重组transglutaminase 2(TG2)腺病毒转染对鼻粘膜骨髓间充质干细胞(EMSCs) 向神经样细胞分化影响.方法:利用贴壁筛选法分离培养和扩增EMSCs,通过免疫荧光方法分析EMSCs的纯度,采用免疫荧光和免疫印迹方法测定转染效率.实验分组:重组TG2腺病毒转染EMSCs(adEMSCs)组、重组GFP腺病毒转染EMSCs组(GFP-EMSCs)和空白对照组(control) ,诱导细胞向神经样细胞分化,倒置显微镜观察分化过程中细胞形态的变化.免疫荧光和免疫印迹方法检测诱导后 EMSCs 的轴突膜蛋白(GAP-43) ,微管相关蛋白(MAP2)和髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达情况.向大鼠脊髓内注射adEMSCs,2周后取脊髓.结果:实验数据表明转染TG2腺病毒的EMSCs可稳定表达TG2.诱导7 d后,adEMSCs组细胞呈现双极和多极的典型神经样细胞形态,并且GAP-43,MAP2和MBP的表达水平较对照组高.移植入体内2周的adEMSCs存活良好且部分细胞表达GAP-43.结论:TG2基因修饰有利于EMSCs在体外向神经样细胞分化,并且具有良好的可移植性.

作者:崔学文;史文涛;戴瑶;毕士奇;杨开元;陈平波;孙勇;张志坚

来源:神经解剖学杂志 2018 年 34卷 3期

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作者:
崔学文;史文涛;戴瑶;毕士奇;杨开元;陈平波;孙勇;张志坚
来源:
神经解剖学杂志 2018 年 34卷 3期
标签:
鼻粘膜 间充质干细胞 组织型谷胺酰氨转胺酶 神经样细胞 nasal mucosa mesenchymal stem cells tissue transglutaminase2 neural-like
目的:研究重组transglutaminase 2(TG2)腺病毒转染对鼻粘膜骨髓间充质干细胞(EMSCs) 向神经样细胞分化影响.方法:利用贴壁筛选法分离培养和扩增EMSCs,通过免疫荧光方法分析EMSCs的纯度,采用免疫荧光和免疫印迹方法测定转染效率.实验分组:重组TG2腺病毒转染EMSCs(adEMSCs)组、重组GFP腺病毒转染EMSCs组(GFP-EMSCs)和空白对照组(control) ,诱导细胞向神经样细胞分化,倒置显微镜观察分化过程中细胞形态的变化.免疫荧光和免疫印迹方法检测诱导后 EMSCs 的轴突膜蛋白(GAP-43) ,微管相关蛋白(MAP2)和髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达情况.向大鼠脊髓内注射adEMSCs,2周后取脊髓.结果:实验数据表明转染TG2腺病毒的EMSCs可稳定表达TG2.诱导7 d后,adEMSCs组细胞呈现双极和多极的典型神经样细胞形态,并且GAP-43,MAP2和MBP的表达水平较对照组高.移植入体内2周的adEMSCs存活良好且部分细胞表达GAP-43.结论:TG2基因修饰有利于EMSCs在体外向神经样细胞分化,并且具有良好的可移植性.