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目的:通过改进原代培养方法,从大面积脑梗塞患者废弃脑组织中培养、传代和鉴定自体神经干细胞(NSCs),并进行诱导分化研究.方法:收集2例右侧大面积脑梗塞患者手术中废弃脑组织各1 g以上,按改良方法进行原代培养并传代,通过细胞免疫荧光染色检测NSCs标志物巢蛋白(nestin)的表达.传代培养至7代时选取部分细胞进行诱导分化研究,通过细胞免疫荧光染色检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和微管蛋白(β-tu-bulin)的表达来评估NSCs分化情况.结果:培养3~7d后,2例患者废弃脑组织中均可见干细胞球生长,nestin检测呈阳性表达.经传代培养至第10代后,仍可维持其神经干细胞特征,选取7代贴壁细胞经β-Tubulin及GFAP免疫荧光检测可见阳性表达.结论:成功从大面积脑梗塞患者前颞叶(邻近于海马区)废弃脑组织中分离培养获得自体NSCs,并可向神经元样细胞及星形胶质样细胞分化.

作者:王佳;史铁钧;赵全军;王涛;崔绍杰;任飞;杨凯

来源:神经解剖学杂志 2019 年 35卷 3期

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作者:
王佳;史铁钧;赵全军;王涛;崔绍杰;任飞;杨凯
来源:
神经解剖学杂志 2019 年 35卷 3期
标签:
神经干细胞 细胞培养 脑梗塞 脑卒中
目的:通过改进原代培养方法,从大面积脑梗塞患者废弃脑组织中培养、传代和鉴定自体神经干细胞(NSCs),并进行诱导分化研究.方法:收集2例右侧大面积脑梗塞患者手术中废弃脑组织各1 g以上,按改良方法进行原代培养并传代,通过细胞免疫荧光染色检测NSCs标志物巢蛋白(nestin)的表达.传代培养至7代时选取部分细胞进行诱导分化研究,通过细胞免疫荧光染色检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和微管蛋白(β-tu-bulin)的表达来评估NSCs分化情况.结果:培养3~7d后,2例患者废弃脑组织中均可见干细胞球生长,nestin检测呈阳性表达.经传代培养至第10代后,仍可维持其神经干细胞特征,选取7代贴壁细胞经β-Tubulin及GFAP免疫荧光检测可见阳性表达.结论:成功从大面积脑梗塞患者前颞叶(邻近于海马区)废弃脑组织中分离培养获得自体NSCs,并可向神经元样细胞及星形胶质样细胞分化.