目的:探究感染水痘-带状疱疹病毒(VZV)对人施万细胞(hSC)朊蛋白(PrPc)、肿瘤坏死因子-α转换酶(TACE)和肿瘤坏死因子-α受体1(TNFR1)表达的影响,及甲钴胺(MCbl)的调节作用.方法:将传代培养的hSC分为:空白对照组、VZV感染组、VZV感染加MCbl干预组、VZV感染PrPc基因(Prnp)siRNA转染细胞组、VZV感染Prnp-siRNA转染细胞加MCbl干预组.设计合成Prnp的siRNA序列转染hSC,构建PrPc表达下调的hSC模型.以感染复数为1.0的VZV分别感染后4组细胞3 d后,加药组分别加入250 μg/ml的MCbl干预.感染7 d后采用CCK-8法评估细胞活力,real time RT-PCR检测Prnp mRNA表达,Western Blot分析PrPc糖基化的变化,免疫荧光双染检测TACE和TNFR1的表达,TACE试剂盒检测其酶活性的变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞上清液中可溶性TNFR1(sTNFR1)的浓度.结果:与对照组比较,感染组细胞活力明显下降(P<0.05).感染组细胞Prnp的mRNA表达与对照组相比上调了 2.7倍,PrPc的单糖基化条带密度明显增加.TACE染色颗粒明显变小,TACE活性为对照组的36%,TNFR1表达与对照组比较明显增多,sTNFR1含量为(16.77±4.57)pg/ml.感染加药组Prnp mRNA表达上调3.7倍,显著高于感染组,PrPc向单糖基化迁移的比例较感染组明显减少.TACE染色颗粒变大,且TACE的活性为对
作者:许纲;周朝生;唐维桢;张雨;徐刚;程超;许洁;王晓梅
来源:神经解剖学杂志 2022 年 38卷 2期