本文介绍了根癌农杆菌T-DNA对云南红豆杉原生质体的转化,分析了转化系的紫杉醇合成能力.实验以生长20 d的云南红豆杉幼茎诱导的淡黄色愈伤组织为材料,经酶解可分离出大量有活力的原生质体.在由B5无机盐、KM有机成分、3.0 mg/L 2,4-D、0.1 mg/L KT和0.45 mol/L果糖组成的培养基中培养1周后,原生质体再生细胞持续分裂形成细胞团.根癌农杆菌对原生质体的转化能力与原生质体生长状态及菌株相关.虽然刚分离的或已再生细胞壁的原生质体不能被根癌农杆菌转化,但由10个以上细胞组成的原生质体克隆和根癌农杆菌B6S3菌株共培养后可实现T-DNA转化,高压纸电泳检测转化系具有冠瘿碱的合成,转化率约为5
作者:罗建平;姜绍通;潘丽军
来源:世界科学技术-中药现代化 2003 年 5卷 3期