目的:研究紫草素通过激活活性氧(ROS)自由基诱导大肠癌细胞凋亡的作用机制.方法:通过MTT测定法检测紫草素对人结肠癌细胞系HCT116和SW480细胞活力的影响,结合Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测细胞凋亡情况;通过Caspase 3/9活性测定试剂盒检测半胱天冬酶活性,使用ROS检测试剂盒检测紫草素处理对HCT116和SW480细胞中ROS水平的影响,并借助Western Blotting检测Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达情况.结果:细胞活力检测结果显示,人正常结肠黏膜上皮细胞系NCM460对紫草素干预不敏感,而紫草素对人结肠癌细胞系HCT116和SW480细胞活力表现出显著的抑制作用(均P<0.05).在紫草素干预后,Western Blotting分析检测到细胞周期蛋白D、c-Myc、Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达水平显著下调(均P<0.05).同时,紫草素以剂量依赖性方式上调了Caspase3和Caspase9蛋白表达水平(均P<0.05).流式细胞术检测结果表明,经10μmol/L紫草素处理24 h后,HCT116和SW480细胞凋亡率增加至59.2％和65.6％,而几乎没有坏死细胞(Annexin V-,PI+);并检测到HCT116和SW480细胞线粒体膜电位被去极化.ROS水平检测结果显示,紫草素以剂量依赖性方式上调了HCT116和SW480细胞ROS水平.结论:紫草素通过线粒体介导途径诱导结肠癌细胞凋亡,Bcl-2蛋白家族和细胞内ROS

作者：孙艳华；李明；徐建立；董路；曹学彬；孟小晶

来源：世界中医药 2021 年 16卷 15期