以RNA干扰技术为手段,HPV编码的癌蛋白E6为靶标,探讨靶向HPV16-E6的siRNA对宫颈癌细胞生物学行为的影响.并试图阐明该实验的临床意义.构建靶向HPV-6-E6的siRNA表达载体,应用体外转染试剂转染HPV16-E6阳性的宫颈癌CaSki细胞.以RT-PCR检测CaSki细胞中E6蛋白的mRNA的表达,借助细胞色素c测定来分析细胞凋亡相关分子的表达和活性,从而研究靶向HPV-6-E6的siRNA诱导细胞凋亡的分子机制.RT-PCR检测结果表明,将靶向HPV16-E6的siRNA的表达载体瞬时转染到HPV16-E6阳性的CaSki细胞后,其所含E6蛋白质和mRNA的表达下调;Western blotting检出抑凋亡蛋白Bcl-2的表达亦告下调;细胞色素c释放实验结果显示,HPV16-E6 siRNA能够诱导细胞色素c从线粒体释放到细胞浆中,从而诱导细胞凋亡.靶向HPV16-E6的siRNA能够有效抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡.靶向HPV16-E6的siRNA为研究重要致瘤蛋白HPV16-E的功能开辟了新途径,给HPV16-E6阳性肿瘤的靶向基因治疗提供新的实验依据.并探索了HPV感染及宫颈癌的新基因疗法.
作者：刘立鹏；田智；黄春霞；郭小芳；粟敏；王晓春
来源：生命科学研究 2009 年 13卷 5期
