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伴侣蛋白CCT 在蛋白折叠、抗胁迫以及调节细胞生长等生理过程中担负重要作用.研究利用同源克隆和RACE 技术克隆了皱纹盘鲍伴侣蛋白CCTζ(HdhCCTζ)cDNA 全长序列,并对CCTζ基因的序列特征进行了分析.HdhCCTζ cDNA 序列长1960 bp,开放阅读框为1599 bp,编码532 个氨基酸,生物学软件推测其编码蛋白相对分子量为58.46 kD,等电点为6.53.BLAST 分析结果表明HdhCCTζ与哺乳动物、鸟和鱼类等物种的CCT 具有较高的同源性.生物信息学分析结果显示,HdhCCTζ蛋白序列中包含3 个典型的CCT 信号基序(35RTNLGPKGTLKML47,56LTKDGNVLLHEMQIQHP72 和84QDDITGDGT92)以及1 个腺苷三磷酸结合基序(89GDGTTS94).此外,在HdhCCTζ蛋白序列中还包含3 个糖基化位点(23NISA26,128NKSL131 and 234NVSL237).实时荧光定量PCR 检测结果显示,HdhCCTζ在皱纹盘鲍组织中为组成型表达,但主要集中在性腺、血淋巴和肝胰腺中表达.使用不同锌含量(6.69 mg/kg、33.85 mg/kg、710.63 mg/kg 和3462.5 mg/kg)的日粮来饲喂幼鲍20 周后,取其肝脏和血细胞总RNA,利用实时荧光定量PCR 技术进行HdhCCTζ mRNA 的表达水平分析.分析结果显示,随着日粮中锌含量的增加,HdhCCTζ mRNA 在血淋巴和肝胰腺中的表达水平呈现上调的趋势.相比于锌适量组(33.85 mg/kg),

作者:吴成龙;张文兵;麦康森;张易祥;高俊娥;叶金云

来源:水生生物学报 2012 年 36卷 3期

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吴成龙;张文兵;麦康森;张易祥;高俊娥;叶金云
来源:
水生生物学报 2012 年 36卷 3期
标签:
伴侣蛋白CCT 皱纹盘鲍 cDNA克隆 mRNA表达 锌 Chaperonin containing T-complex polypeptide Haliotis discus hannai Ino cDNA cloning mRNA expression zinc
伴侣蛋白CCT 在蛋白折叠、抗胁迫以及调节细胞生长等生理过程中担负重要作用.研究利用同源克隆和RACE 技术克隆了皱纹盘鲍伴侣蛋白CCTζ(HdhCCTζ)cDNA 全长序列,并对CCTζ基因的序列特征进行了分析.HdhCCTζ cDNA 序列长1960 bp,开放阅读框为1599 bp,编码532 个氨基酸,生物学软件推测其编码蛋白相对分子量为58.46 kD,等电点为6.53.BLAST 分析结果表明HdhCCTζ与哺乳动物、鸟和鱼类等物种的CCT 具有较高的同源性.生物信息学分析结果显示,HdhCCTζ蛋白序列中包含3 个典型的CCT 信号基序(35RTNLGPKGTLKML47,56LTKDGNVLLHEMQIQHP72 和84QDDITGDGT92)以及1 个腺苷三磷酸结合基序(89GDGTTS94).此外,在HdhCCTζ蛋白序列中还包含3 个糖基化位点(23NISA26,128NKSL131 and 234NVSL237).实时荧光定量PCR 检测结果显示,HdhCCTζ在皱纹盘鲍组织中为组成型表达,但主要集中在性腺、血淋巴和肝胰腺中表达.使用不同锌含量(6.69 mg/kg、33.85 mg/kg、710.63 mg/kg 和3462.5 mg/kg)的日粮来饲喂幼鲍20 周后,取其肝脏和血细胞总RNA,利用实时荧光定量PCR 技术进行HdhCCTζ mRNA 的表达水平分析.分析结果显示,随着日粮中锌含量的增加,HdhCCTζ mRNA 在血淋巴和肝胰腺中的表达水平呈现上调的趋势.相比于锌适量组(33.85 mg/kg),