为了研究干扰素基因刺激因子STING在中华鳖(Pelodiscus sinensis)先天免疫中的作用,克隆了中华鳖STING基因(PsSTING)的cDNA序列,其全长为2145 bp,包含1152 bp的开放阅读框,编码383个氨基酸.氨基酸序列比对发现,PsSTING蛋白N端含有4个跨膜区和2个RXR内质网滞留基序,C端有1个解旋酶结构域.qRT-PCR结果显示,PsSTING在中华鳖心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、小肠、胃、皮肤、肌肉和血细胞等组织中均能表达,其中在脾脏中的表达量最高,其次是肝脏、小肠和肺,而在血细胞中的表达量最低;用嗜水气单胞菌、LPS和poly(I:C)刺激后,PsSTING基因呈现出先上调后下调的趋势,在刺激12h时显著高于对照组(P<0.05),24h达到最高值,在48h后逐渐恢复到初始水平,其蛋白表达量在脾脏和小肠中明显增加.体内RNA干扰后,小肠中PsSTING的表达量显著下调(P<0.05),IFN信号通路中TBK1、IRF3、IRF7、STAT6和IFN-β等基因表达水平显著下调(P<0.05).在HEK293T细胞中过表达PsSTING基因,能够显著激活pIFN-β-luc的启动子.研究结果表明PsSTING基因参与调控了中华鳖的先天免疫反应.
作者：陈明；周谢菲；高建军；朱庭耀；彭佳诚；徐海圣
来源：水生生物学报 2022 年 46卷 3期
