利用反向遗传技术获得表达H5亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)的新城疫病毒(NDV).克隆NDV clone 30的全长基因,通过在NDV的融合蛋白基因和血凝素-神经氨酸酶(HN)基因之间插入编码高致病性AIV分离株A/chicken/italy/8/98(H5N2)的血凝素基因开放阅读框从而获得两株重组新城疫病毒NDVH5和NDVH5m.NDVH5感染的细胞可以检测到两种HA转录产物.对于重组病毒NDVH5m,NDV位于HAORF的转录终止信号序列被沉默突变消除,产生2.7个全长HA转录产物的折叠,从而使修饰过的HA得到稳定地高表达.1日龄小鸡的脑内接种证实了两种重组病毒均无致病性.鸡群在NDVH5m诱导产生的NDV和H5亚型AIV HA特异性抗体的免疫力下能够免于致死剂量的NDV与高致病性AIV的感染.血清学研究结果表明NDVH5m免疫鸡群产生的抗体可结合NP蛋白抗体的检测从而用于区分免疫和感染AIV的动物.因此,NDVH5m重组病毒可作为抗NDV和AIV的"二联疫苗",也可成为控制AI的标记疫苗.
作者：杨大光；柴丽娜；王新卫
来源：现代生物医学进展 2007 年 7卷 9期
