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目的:确立pEGFP-ORF2质粒在不同细胞密度,不同转染时间,及血清存在与否时在细胞中的有效表达,为进一步研究HSV-2LAT ORF2对细胞的作用,及阐明HSV-2潜伏复发机制打下基础.方法:采用脂质体法将pEGFP-ORF2与pEGFP-C2两个真核表达载体转染Vero细胞,观察荧光蛋白表达.结果:有无血清对转染效果无明显差异.在细胞密度为4.0×104cells/ml,转染后84h EGFP表达量较其它条件下高,且在相同条件下pEGFP-ORF2与pEGFP-C2的表达无明显差异.结论:血清对表达效果的影响不大,细胞的接种密度及转染时间对转染有明显作用,以荧光蛋白作为标签鉴定蛋白表达的方法切实可行.

作者:白利利;杨慧兰

来源:现代生物医学进展 2009 年 9卷 16期

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作者:
白利利;杨慧兰
来源:
现代生物医学进展 2009 年 9卷 16期
标签:
荧光表达 Vero细胞系 脂质体转染
目的:确立pEGFP-ORF2质粒在不同细胞密度,不同转染时间,及血清存在与否时在细胞中的有效表达,为进一步研究HSV-2LAT ORF2对细胞的作用,及阐明HSV-2潜伏复发机制打下基础.方法:采用脂质体法将pEGFP-ORF2与pEGFP-C2两个真核表达载体转染Vero细胞,观察荧光蛋白表达.结果:有无血清对转染效果无明显差异.在细胞密度为4.0×104cells/ml,转染后84h EGFP表达量较其它条件下高,且在相同条件下pEGFP-ORF2与pEGFP-C2的表达无明显差异.结论:血清对表达效果的影响不大,细胞的接种密度及转染时间对转染有明显作用,以荧光蛋白作为标签鉴定蛋白表达的方法切实可行.