目的:研究β-蔡黄酮对荧光素酶活性的影响.方法:利用人GCLC基因调控序列驱动的GCLC-PGL3-enhancer-Luciferase报道载体( PL45)转染人肺腺癌细胞A549,人肝癌细胞HepG2,人子宫颈癌细胞HeLa,人乳腺癌细胞MCF-7,人肝癌细胞Bel-7402,人支气管上皮细胞16HBE,β-萘黄酮刺激后,双荧光素酶报告基因检测系统分析其对GCLC基因表达的影响.wester blot检测β-NF刺激16HBE细胞后GCLC蛋白水平的变化.β-萘黄酮刺激转染了表达Luciferase的真核表达载体pRC/CMV2- luc+的A549和HepG2细胞后,双荧光素酶报告基因检测系统分析其对Luciferase基因表达的影响.PL45转染A549和HepG2细胞,裂解细胞后用β-NF刺激,双荧光素酶报告基因检测系统分析其对Luciferase基因的影响.结果:在各种细胞中,转染PL45报道载体后,β-NF处理组荧光素酶相对活性值与DMSO对照组相比均明显下降(P<0.01).wester blot结果显示β-NF处理组GCLC蛋白的表达较DMSO对照组明显升高.在A549和HepG2细胞中,转染pRC/CMV2- luc+载体后,β-NF处理组荧光素酶相对活性值与DMSO对照组相比均明显下降(P<0.01).PL45转染A549和HepG2细胞,裂解细胞后用β-NF刺激,β-NF处理组荧光素酶相对活性值与DMSO对照组相比均明显下降(P<0.01).结论:β-蔡黄酮直接抑制了荧光素酶的活性.
作者:王胜;陈云芳;付欣;洪伟;李冰
来源:现代生物医学进展 2011 年 11卷 20期