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目的:建立一种基于荧光偏振技术的宫颈癌组织标本中EGFR启动子甲基化检测的新方法.方法:设计通用引物,在封闭管中同时扩增EGFR启动子甲基化与非甲基化等位基因片段,再同时用序列特异的FAM或TAMRA荧光标记探针对扩增产物进行杂交检测,利用荧光偏振仪检测扩增杂交反应的荧光偏振值,确定EGFR启动子甲基化状态.应用荧光偏振法检测63例宫颈癌组织样本,并与直接测序法进行对比验证.结果:本方法检测EGFR启动子甲基化结果与直接测序法结果无统计学差异,且最低检测浓度为50拷贝/μl,最低检测含量可达10%,敏感度高.结论:本方法检测EGFR启动子甲基化灵敏度与准确度较高,为临床宫颈癌个体化治疗相关检测提供了新技术.

作者:姜英浩;张潍;俞青苗;强少盈;梁平;程红;高艳娥;赵星烨;张菊

来源:现代生物医学进展 2014 年 14卷 11期

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作者:
姜英浩;张潍;俞青苗;强少盈;梁平;程红;高艳娥;赵星烨;张菊
来源:
现代生物医学进展 2014 年 14卷 11期
标签:
荧光偏振检测 宫颈癌 表皮生长因子受体 甲基化 Fluorescence polarization Cervical cancer Epithelial growth factor receptor(EGFR) Methylation
目的:建立一种基于荧光偏振技术的宫颈癌组织标本中EGFR启动子甲基化检测的新方法.方法:设计通用引物,在封闭管中同时扩增EGFR启动子甲基化与非甲基化等位基因片段,再同时用序列特异的FAM或TAMRA荧光标记探针对扩增产物进行杂交检测,利用荧光偏振仪检测扩增杂交反应的荧光偏振值,确定EGFR启动子甲基化状态.应用荧光偏振法检测63例宫颈癌组织样本,并与直接测序法进行对比验证.结果:本方法检测EGFR启动子甲基化结果与直接测序法结果无统计学差异,且最低检测浓度为50拷贝/μl,最低检测含量可达10%,敏感度高.结论:本方法检测EGFR启动子甲基化灵敏度与准确度较高,为临床宫颈癌个体化治疗相关检测提供了新技术.