目的:研究重组真核抗菌肽人β防御素3-糖类结合域(human β defensin 3-carbohydrate-binding domain,hBD3-CBD)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA) N315的抑菌作用.方法:用重叠延伸剪接技术将抗菌肽和融合抗菌肽hBD3、hBD3-CBD1、hBD3-CBD2的基因序列克隆入真核表达载体pVAX1并转染HEK293T细胞,通过逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、Western blot方法检测其表达情况;并通过感染后细菌计数和上清液白细胞介素6(interleukin-6,Ⅱ-6)浓度来检测抗菌肽转染HEK293T细胞对MRSA N315的抑制作用.结果:抗菌肽hBD3、hBD3-CBD1、hBD3-CBD2转染HEK293T细胞后均有表达;感染后6和12小时,hBD3、hBD3-CBD1和hBD3-CBD2均显示出对MRSA N315的抑菌作用;感染后12小时,hBD3-CBD1和hBD3-CBD2的抑菌作用优于hBD3,hBD3-CBD1和hBD3-CBD2之间的抑菌作用没有差异;感染后6和12小时,hBD3、hBD3-CBD1、hBD3-CBD2的细胞上清液IL-6浓度显著低于对照组,而hBD3-CBD1和hBD3-CBD2两组之间的IL-6浓度未见差异.结论:真核表达抗菌肽hBD3、hBD3-CBD对MRSA N315对HEK293T细胞的感染有显著抑制作用,且重组抗菌肽hBD3-CBD的直接抑菌作用优于hBD3.

作者：黄洁雯；宋珍；郭晓奎；李擎天

来源：现代生物医学进展 2014 年 14卷 31期