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精子蛋白SP22与生殖功能密切相关.睾丸附睾毒物氯醇硝唑作用于大鼠生殖系统时,精子表面SP22大量脱落至附睾液中,导致生育力降低.深入研究发现SP22与生育力存在量的关系.从人睾丸组织中提取总RNA,通过RT-PCR克隆出人睾丸组织中的SP22基因,连入pGEM-Teasy vector进行cDNA克隆测序.再亚克隆到pET-28a-c(+)vectors成功构建pET-28a-c(+)vectors/SP22表达载体,并转化BL21(DE3),以IPTG诱导表达,对诱导剂浓度、诱导时间进行优化后以镍离子亲和层析纯化目的蛋白.蛋白表达量占菌体总蛋白30

作者:宛传丹;黄宇烽;许晓风

来源:中国生物工程杂志 2004 年 24卷 12期

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宛传丹;黄宇烽;许晓风
来源:
中国生物工程杂志 2004 年 24卷 12期
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精子蛋白SP22 cDNA克隆 pET-28a-c(+) 镍离子亲和层析柱
精子蛋白SP22与生殖功能密切相关.睾丸附睾毒物氯醇硝唑作用于大鼠生殖系统时,精子表面SP22大量脱落至附睾液中,导致生育力降低.深入研究发现SP22与生育力存在量的关系.从人睾丸组织中提取总RNA,通过RT-PCR克隆出人睾丸组织中的SP22基因,连入pGEM-Teasy vector进行cDNA克隆测序.再亚克隆到pET-28a-c(+)vectors成功构建pET-28a-c(+)vectors/SP22表达载体,并转化BL21(DE3),以IPTG诱导表达,对诱导剂浓度、诱导时间进行优化后以镍离子亲和层析纯化目的蛋白.蛋白表达量占菌体总蛋白30