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枯草芽孢杆菌ZC-7的发酵液,经离心分离得到粗酶液,再经硫酸铵盐析、中空纤维膜除盐浓缩、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-75柱层析等步骤获得电泳纯的中性蛋白酶.SDS-PAGE测得其分子量大约为42kDa.以酪蛋白为底物时,该酶的Km为5×10-3,Vmax为2.5×104μg/min,酶的最适作用pH为7.0,最适反应温度为55℃,在pH6.5~8.0,40℃以下较稳定,对1mol/Lh2O2具有一定的耐受性.EDTA、异丙醇和乙醇对该酶有抑制作用,Ca2+、Mg2+和Li+离子对其具有保护作用.

作者:赵丛;张敏;王建玲;杜连祥;殷向斌

来源:中国生物工程杂志 2007 年 27卷 10期

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作者:
赵丛;张敏;王建玲;杜连祥;殷向斌
来源:
中国生物工程杂志 2007 年 27卷 10期
标签:
枯草芽孢杆菌 中性蛋白酶 纯化 性质
枯草芽孢杆菌ZC-7的发酵液,经离心分离得到粗酶液,再经硫酸铵盐析、中空纤维膜除盐浓缩、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-75柱层析等步骤获得电泳纯的中性蛋白酶.SDS-PAGE测得其分子量大约为42kDa.以酪蛋白为底物时,该酶的Km为5×10-3,Vmax为2.5×104μg/min,酶的最适作用pH为7.0,最适反应温度为55℃,在pH6.5~8.0,40℃以下较稳定,对1mol/Lh2O2具有一定的耐受性.EDTA、异丙醇和乙醇对该酶有抑制作用,Ca2+、Mg2+和Li+离子对其具有保护作用.