采用RT-PCR扩增编码中国明对虾Prx成熟肽的基因,并克隆到大肠杆菌表达载体pCR(R) T7/NT TOPO(R) TA中进行体外重组表达.重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3) pLysS后,经IPTG诱导表达产生包涵体形式的目的蛋白.对重组蛋白进行LC-ESI-MS分析,结果表明融合蛋白的4个肽段与中国明对虾Prx相应肽段完全一致.将重组蛋白通过金属螯合柱进行纯化,进而透析、复性,最后获得了具有较高过氧化物酶活性的重组Prx.
作者:张庆利;李富花;张继泉;蒋昊;相建海
来源:中国生物工程杂志 2008 年 28卷 2期