透明质酸(HA)在保健品、化妆品及临床医疗等领域都具有重要应用,发酵法是HA生产的主要方法.发酵液中HA含量的快速、准确测定对于HA的生产具有重要意义.在原始十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)浊度法测量HA浓度的基础上,提出了去除HA与乙酸缓冲液混合后的水浴步骤、降低CTAB试剂浓度(2.5 g/L)以及确定HA-CTAB络合反应时间(5 min)的改良CTAB法.进一步研究了发酵液各成分对改良CTAB方法的干扰,结果表明,葡萄糖、阿拉伯糖、D-葡萄糖酸前体等对CTAB浊度法没有干扰,但Mg~(2+)等具有较为明显的干扰.通过冰乙醇沉淀与改良CTAB浊度法的耦合,实现了发酵液中HA含量的高效测定.
作者:文程;于慧敏;孙云鹏;王颖;沈忠耀
来源:中国生物工程杂志 2010 年 30卷 2期