集成干扰素突变体IIFN_(72C)的构建及其聚乙二醇定点修饰-临床诊疗知识库

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作者：

黄湘鹭；陶杉杉；徐晨；李洁；周建平

来源：

中国生物工程杂志 2010 年 30卷 4期

标签：

集成干扰素定点突变聚乙二醇定点修饰 Integrated interferon Site-directed mutagenesis Site-specific pegylation

目的:设计构建集成干扰素突变体IIFN_(72C)并进行聚乙二醇定点修饰,以获得高活性的长效干扰素分子.方法:利用蛋白质分子同源模建,选择在集成干扰素分子IIFN的第72位引入半胱氨酸残基构成集成干扰素突变体IIFN_(72C).诱导表达后经包涵体变复性和层析纯化,与单甲氧基聚乙二醇(mPEG-MAL)定点偶联.修饰产物经纯化后,以SDS-PAGE考察其纯度,用WISH-VSV系统进行生物活性测定.结果:IIFN_(72C)以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的30

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