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将酿酒酵母海藻糖代谢工程与全基因组重组技术相结合,改良工业酿酒酵母菌株的抗逆性和乙醇发酵性能.对来源于二倍体出发菌株Zd4的两株优良单倍体Z1和Z2菌株进行杂交获得基因组重组菌株Z12,并对Z1和Z2先进行(1)过表达海藻糖6-磷酸合成酶基因(TPS1),(2)敲除海藻糖水解酶基因(ATH1),(3)同时过表达TPS1和敲除ATH1,经此三种基因工程操作后再进行杂交获得代谢工程菌株的全基因组重组菌株Z12ptps1、Z12△ath1和Z12pT△4.与亲株Zd4相比,Z12及结合代谢工程获得的菌株在高糖、高乙醇浓度与高温条件下生长与乙醇发酵性能都有不同程度的改进.对比研究结果表明:在高糖发酵条件下,同时过表达TPS1和敲除ATH1的双基因操作工程菌株胞内海藻糖积累、乙醇主发酵速率和乙醇产量相对于亲株的提高幅度要大于只过表达TPS1,或敲除ATH1的工程菌.结合了全基因组重组后获得的二倍体工程菌株Z12pT△A,与原始出发菌株Zd4及重组子Z12相比,主发酵速率分别提高11.4

作者:张晓阳;杜风光;池小琴;王品美;郑道琼;吴雪昌

来源:中国生物工程杂志 2011 年 31卷 7期

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作者:
张晓阳;杜风光;池小琴;王品美;郑道琼;吴雪昌
来源:
中国生物工程杂志 2011 年 31卷 7期
标签:
酿酒酵母 代谢工程 基因组重组 乙醇发酵 逆境
将酿酒酵母海藻糖代谢工程与全基因组重组技术相结合,改良工业酿酒酵母菌株的抗逆性和乙醇发酵性能.对来源于二倍体出发菌株Zd4的两株优良单倍体Z1和Z2菌株进行杂交获得基因组重组菌株Z12,并对Z1和Z2先进行(1)过表达海藻糖6-磷酸合成酶基因(TPS1),(2)敲除海藻糖水解酶基因(ATH1),(3)同时过表达TPS1和敲除ATH1,经此三种基因工程操作后再进行杂交获得代谢工程菌株的全基因组重组菌株Z12ptps1、Z12△ath1和Z12pT△4.与亲株Zd4相比,Z12及结合代谢工程获得的菌株在高糖、高乙醇浓度与高温条件下生长与乙醇发酵性能都有不同程度的改进.对比研究结果表明:在高糖发酵条件下,同时过表达TPS1和敲除ATH1的双基因操作工程菌株胞内海藻糖积累、乙醇主发酵速率和乙醇产量相对于亲株的提高幅度要大于只过表达TPS1,或敲除ATH1的工程菌.结合了全基因组重组后获得的二倍体工程菌株Z12pT△A,与原始出发菌株Zd4及重组子Z12相比,主发酵速率分别提高11.4