目的:探讨TFPI-2基因对人肝癌细胞Hep3B生长增殖、凋亡及甲胎蛋白AFP表达的影响.方法:将重组质粒PCDNA3.1-TFPI-2转染Hep3B细胞并经G418稳定筛选后,RT-PCR和Western blot检测转染前后TFPI-2 mRNA和蛋白表达水平,采用CCK-8法、生长曲线观察TFPI-2对人肝癌细胞Hep3B生长增殖的影响,通过平板克隆形成实验观察单个细胞的增殖能力,RT-PCR检测AFP mRNA的表达,并用电化学发光法测定培养上清液中甲胎蛋白AFP含量,流式细胞仪检测细胞早晚期凋亡情况.结果:转染成功的Hep3B细胞检测到TFPI-2 mRNA和蛋白的表达；与转染空载体及未转染的细胞相比,转染TFPI-2的细胞生长增殖能力明显减弱；AFP mRNA表达抑制率为16.51％,AFP蛋白分泌明显低于对照组(P＜0.01)；流式细胞术检测转染TFPI-2的Hep3B细胞早期凋亡率明显增加(24.03％ ±7.28％ vs 8.77％±3.66％).结论:TFPI-2表达可显著抑制肝癌细胞生长和AFP的表达,同时还能诱导细胞早期凋亡.为进一步探讨靶向TFPI-2的肝癌基因治疗提供了实验依据.
作者：秦晓林；徐勇；范晓卿；李武县；匡文斌；成凤；涂植光
来源：中国生物工程杂志 2011 年 31卷 12期
