目的:在杆状病毒表达系统中表达融合蛋白乙型肝炎病毒前C蛋白-小鼠IgG Fc蛋白(HBV precore protein-mouse IgG Fc,HBV pre-c-Fc),并鉴定其免疫原性.方法:目的基因HBV pre-c-Fc连接到pFastBacl载体,获得的pFastBacl-HBV pre-c-Fc质粒转化DH10Bac感受态,通过Tn7 转座子将目的基因转座到Bacmid中,得到Bacmid-HBV pre-c-Fc穿梭载体,脂质体包被后转染Sf9昆虫细胞获得P1代病毒,重复转染Sf9获得高滴度病毒.收集细胞上清超滤后通过Protein G亲和层析柱纯化得到目的蛋白HBV pre-c-Fc.纯化的蛋白大腿内侧肌肉注射免疫BALB/c小鼠并检测血清中乙型肝炎病毒核心蛋白抗体产生量.结果:HBV pre-c-Fc在昆虫细胞中成功表达,纯化后蛋白纯度达90％以上,蛋白产量约为3.03mg/L,纯化蛋白能有效刺激BALB/c小鼠产生特异抗体.结论:成功地在杆状病毒表达系统中表达了具有免疫原性的HBV pre-c-Fc蛋白,为生产乙肝治疗性疫苗奠定了基础.
作者：王晓艳；陈娜子；艾君；赵央；吴美玉；黄金枝；姜潮；李校堃
来源：中国生物工程杂志 2015 年 35卷 4期
