探索生物转化法制备L-天冬酰胺的技术与工艺.通过分子生物学方法,克隆来源于大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli JM 109的天冬酰胺合成酶A基因asnA,并于E.coli BL21(DE3)中表达,利用构建的E.coli基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)-asnA全细胞高密度催化L-天冬氨酸生产L-天冬酰胺,以PITC柱前衍生-高效液相检测底物和产物.表达的蛋白质分子质量约为37kDa,与预期大小相符,比酶活力为1786.6U/g.L-天冬氨酸转化率为95.8％,L-天冬酰胺产量可达126.5g/L,生产速率为15.81g/(L·h).结果表明,已成功构建高效表达天冬酰胺合成酶A基因工程菌株,并用于催化L-天冬氨酸转化生产L-天冬酰胺,解决了L-天冬酰胺生物转化生产工艺中ATP成本过高的难题,为L-天冬酰胺制备提供新的绿色途径.
作者：张奇；张露；徐友强；裴疆森；程池
来源：中国生物工程杂志 2016 年 36卷 1期
