目的:研究过表达miR-155对BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响.方法:①用重组腺病毒Ad-BMP9(BMP9)诱导C3H10T1/2细胞成骨分化,定量PCR (qPCR)检测miR-155的表达,RT-PCR检测Runx2和ALP的表达.②miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,qPCR检测miR-155的表达,ALP活性和染色检测早期成骨能力.③miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,诱导分化14d茜素红S染色检测晚期成骨能力.④miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,qPCR检测成骨分化相关基因Runx2、OSX、COL1A1、ALP、OCN和OPN的表达.⑤miR-155和BMP9共同处理C3H10T1/2细胞,Western blot检测p-Smad1/5/8、OCN和OPN蛋白水平的表达.⑥qPCR和Western blot分别检测HIF1 α和VEGF的mRNA表达水平和蛋白质表达水平.⑦应用荧光素酶报告基因对miR-155的靶基因进行筛选和验证.结果:在BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化过程中,过表达miR-155降低ALP活性及染色;减少钙盐沉积;成骨分化相关基因Runx2、OSX、COL1A1、ALP、OCN和OPN表达降低;抑制p-Smad1/5/8、OCN和OPN蛋白水平的表达;HIF1α和VEGF的mRNA和蛋白表达水平减少.在对靶基因的检测中,过表达miR-155可以抑制HIF1α蛋白水平的表达,但对其mRNA水平无明显影响.结论:miR-155过表达减弱BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/

作者：刘红霞；施琼；周一青；安利钦；严树涓；张汝益；翁亚光

来源：中国生物工程杂志 2017 年 37卷 5期