目的:通过研究人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)Tat蛋白对骨髓间充质干细胞(BMSC)造血支持功能的影响,进一步揭示HIV-1感染者造血损伤的机理.方法:原代培养BMSC,流式检测其表面标志,诱导分化鉴定其多向分化潜能;免疫磁珠分选造血干细胞(HSC),流式检测其纯度;HIV-1 Tat蛋白添加到培养基中培养20天的BMSC(BMSCTat)与对照BMSC (BMSCcon)分别作为滋养层与HSC分6组进行共培养,随后计数各组造血细胞总数,诱导分化检测造血细胞集落形成能力;RT-PCR检测BMSCTat和BMSCcon造血相关因子mRNA的表达强度,ELISA检测BMSCTat和BMSCcon条件培养液中造血相关因子GM-CSF及IL-6的浓度.结果:经鉴定成功培养获得原代BMSC;免疫磁珠分选的HSC纯度可达95％以上;分6组共培养进行比较,以BMSCTat为滋养层培养的造血细胞总数及造血细胞形成的集落总数均明显少于以BMSCcon为滋养层;BMSCTat的造血相关因子的mRNA的表达明显弱于BMSCcon,BMSCTat的条件培养液中GM-CSF和IL-6的浓度均明显低于BMSCcon.结论:HIV-1 Tat蛋白对BMSC的造血支持功能有明显的抑制作用.
作者：袁雅红；赵珊珊；王小莉；腾智平；李东升；曾毅
来源：中国生物工程杂志 2017 年 37卷 6期
