利用基因工程技术制备抗原性好的弓形虫GRA6蛋白和P30蛋白的融合蛋白,并用作抗原检测弓形虫抗体.根据弓形虫GRA6蛋白和P30蛋白的氨基酸序列,通过计算机分析,筛选出其中较强的抗原决定簇.用PCR方法分别扩增含抗原决定簇的基因片段.将这两个基因片段克隆至同一质粒pET28a(+)内,表达一个融合蛋白.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选表达该融合蛋白的工程菌.纯化表达的融合蛋白,用已知的6份抗弓形虫IgM阳性血清和大量正常人血清,ELISA法检测纯化融合蛋白的抗原性和特异性.获得了高效表达含弓形虫GRA6蛋白和P30蛋白抗原表位的工程菌,表达的融合蛋白约占菌体蛋白总量的25
作者：李越希；张锦海；陶开华；黄培堂
来源：生物工程学报 2003 年 19卷 6期
