制备抗人肝细胞生长因子激活物抑制因子(HAI-1)单克隆抗体,为对HAI-1进行进一步的研究打下基础.将人HAI-1 cDNA分段克隆,构建GST-HAI-1融合蛋白原核表达载体,转化大肠杆菌后加IPTG诱导融合蛋白表达,经制备型SDS-PAGE法分离表达的GST-HAI-1融合蛋白,通过割胶、电洗脱回收融合蛋白,并以此为抗原免疫BALB/c小鼠,应用细胞融合技术制备产生抗人HAI-1单克隆抗体的杂交瘤,以ELISA、Western blot和免疫组织化学染色进行鉴定.最终获得抗人HAI-1单克隆抗体杂交瘤细胞株ZMC6,产生的单克隆抗体可特异性地与表达的GST-HAI-1融合蛋白反应,并可识别大肠组织中的膜型及脱落型HAI-1蛋白.该单克隆抗体的制备成功,为深入研究HAI-1的功能提供了有力工具.
作者：程海霞；曹江；沈建根；郑树
来源：生物工程学报 2004 年 20卷 4期
