缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1 α,HIF-1 α)是细胞在缺氧等条件下稳定表达的具有转录活性的蛋白,通过与多种靶基因调控区的缺氧反应元件(hypoxia response element,HRE)结合,调控靶基因表达,使机体对缺氧、缺血等病理生理过程产生适应性反应.为从整体动物水平研究HIF-1 α的作用,需要建立HIF-1 α相关遗传修饰小鼠.分别针对HIF-1 α mRNA序列的两个靶位点合成两对互补的寡核苷酸链,构建可诱导的RNA干扰真核表达载体HIF-AB和HIF-CD.分别将CRE重组酶真核表达载体CRE-ERT2与HIF-AB或HIF-CD转染入RAW264.7细胞,筛选得到稳定表达CRE-ERT2与HIF-AB,或CRE-ERT2与HIF-CD的稳定细胞系.在用4-HT诱导去除上述细胞系中HIF-AB或HIF-CD所含的Neo基因后,用CoCl2诱导HIF-1 α表达,采用半定量RT-PCR检测HIF-AB或HIF-CD对HIF-1 α基因表达的影响.结果发现干扰载体(HIF-AB和HIF-CD)对HIF-1αmRNA序列的沉默效果分别为85
作者：戚华兵；宋瑞华；杜晓兰；赵玲；苏楠；刘道诚；李福兵；陈林
来源：生物工程学报 2008 年 24卷 1期
