近年的研究表明,口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)2C在区分灭活疫苗免疫动物与自然感染动物方面具有潜在的价值,为了建立敏感性更高的鉴别诊断方法.将截取了2C蛋白N-端和c-端的主要B细胞表位区和完整3AB蛋白基因组合后,进行了原核表达,得到了分子量约为47.6 kD的目的蛋白2C'3AB.通过Western blotting分析证明,表达产物能被FMDV感染动物阳性血清识别,具有很好的反应性.以通过电泳纯化的目的蛋白作抗原进行间接ELISA检测不同来源的动物血清,结果表明,该抗原仅与感染动物血清具有很好的反应活性,而与健康动物与免疫动物血清无反应,说明重组蛋白2C'3AB可作为区分灭活疫苗免疫动物与感染动物的鉴别诊断抗原.用2C'3AB和3ABC为抗原进行间接ELISA,对比检测田间血清样品,结果显示2C'3AB-ELISA敏感性比3ABC-ELISA高.说明以重组蛋白2C'3AB作为鉴别诊断抗原,能进一步提高对临界值血清的检出率,这对区分灭活疫苗免疫动物与FMDV隐性感染动物与带毒动物具有非常重要的意义.
作者:张小丽;田美娜;卢曾军;付元芳;马小军;刘在新;谢庆阁
来源:生物工程学报 2009 年 25卷 1期