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DNA-PKcs作为DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PK)的催化亚基在DNA双链断裂(DSBs)的非同源末端重组(NHEJ)通路中起重要的作用.本实验以人乳腺上皮细胞株MCF10F为研究对象,通过siRNA技术抑制细胞内DNA-PKcs的表达,用50 cGy 137Cs照射细胞,测定细胞生长曲线以确定细胞对低剂量辐射(LDR)的敏感性,同时检测DNA修复相关蛋白表达的变化,旨在探讨DNA依赖蛋白激酶(DNA-PKcs)基因沉默对人乳腺上皮细胞株MCF10F低剂量辐射敏感性的影响及机制.结果显示:转染特异性siRNA可使人乳腺上皮细胞(MCF10F)DNA-PKcs基因沉默,增殖受到明显的抑制;50 cGy γ射线辐射可使乳腺细胞内DNA-PKcs、Ku80、ATM.P53等DNA修复相关蛋白表达增多,但DNA-PKcs基因沉默细胞(MCF10Fpk)中,这些蛋白表达显著低于对照组(MCF10Fmock).以上结果提示,DNA-PKcs基因沉默可引起乳腺细胞对低剂量辐射敏感性增加.其原因可能与相关DNA修复蛋白表达减少有关.

作者:邹伟;车鉴;王崇杰;崔玉影;张钦明

来源:生物工程学报 2009 年 25卷 5期

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作者:
邹伟;车鉴;王崇杰;崔玉影;张钦明
来源:
生物工程学报 2009 年 25卷 5期
标签:
乳腺细胞 基因沉默 DNA-PKcs基因
DNA-PKcs作为DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PK)的催化亚基在DNA双链断裂(DSBs)的非同源末端重组(NHEJ)通路中起重要的作用.本实验以人乳腺上皮细胞株MCF10F为研究对象,通过siRNA技术抑制细胞内DNA-PKcs的表达,用50 cGy 137Cs照射细胞,测定细胞生长曲线以确定细胞对低剂量辐射(LDR)的敏感性,同时检测DNA修复相关蛋白表达的变化,旨在探讨DNA依赖蛋白激酶(DNA-PKcs)基因沉默对人乳腺上皮细胞株MCF10F低剂量辐射敏感性的影响及机制.结果显示:转染特异性siRNA可使人乳腺上皮细胞(MCF10F)DNA-PKcs基因沉默,增殖受到明显的抑制;50 cGy γ射线辐射可使乳腺细胞内DNA-PKcs、Ku80、ATM.P53等DNA修复相关蛋白表达增多,但DNA-PKcs基因沉默细胞(MCF10Fpk)中,这些蛋白表达显著低于对照组(MCF10Fmock).以上结果提示,DNA-PKcs基因沉默可引起乳腺细胞对低剂量辐射敏感性增加.其原因可能与相关DNA修复蛋白表达减少有关.