支持细胞是睾丸的重要组成部分,其主要功能是为生精细胞提供适宜的生长环境.从幼鼠睾丸中分离得到支持细胞,并通过苏木精-伊红和Fas-L免疫组化染色对分离得到的细胞进行了鉴定.通过对原代小鼠睾丸支持细胞的贴壁,生长和培养液中葡萄糖、谷氨酰胺、氨基酸等营养底物及其副产物乳酸、铵根离子等的代谢以及培养液渗透压和pH的研究,发现支持细胞的贴壁时间主要集中在接种后2-4 h;当培养液中氨根离子浓度高于2.3 mmol/L,渗透压高于326 mosm/kg,pH≤6.8时支持细胞生长进入衰亡期;在氨基酸代谢方面,发现培养过程中丙氨酸和谷氨酸浓度迅速增加,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸浓度略有降低,丝氨酸、精氨酸和甘氨酸浓度基本保持不变.因此培养液中铵根离子浓度的过量积累、渗透压和pH的异常和贴壁面积不足是限制支持细胞静态生长的主要因素.研究结果为支持细胞大规模培养及工艺优化奠定了基础.
作者：师冰洋；张淑香；郭美锦；王永红；张嗣良；史小林
来源：生物工程学报 2009 年 25卷 5期
