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在10L发酵罐中,对高致病性禽流感病毒H5N1糖蛋白HA1在重组毕赤酵母中的表达发酵工艺进行了研究.通过分批补料培养方法探讨不同培养温度、诱导温度、补料方式、微量元素等因素对菌体的生长以及重组蛋白表达和活性的影响.结果表明,菌种培养和诱导温度均为25℃时,菌体的生长、分泌表达量和与广谱中和抗体的反应活性较好;微量元素是影响重组HA1蛋白生物活性的重要因素;通过优化高密度发酵工艺,H5N1病毒糖蛋白HA1在发酵罐中的表达量比摇瓶培养提高10.5倍,达到约120 mg/L,为大规模制备高致病性禽流感病毒的HA1蛋白奠定了基础.

作者:杨坤宇;何芳萍;李少伟;张佳鸿;林庆山;陈振钦;李仲艺;张军;夏宁邵

来源:生物工程学报 2009 年 25卷 5期

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杨坤宇;何芳萍;李少伟;张佳鸿;林庆山;陈振钦;李仲艺;张军;夏宁邵
来源:
生物工程学报 2009 年 25卷 5期
标签:
毕赤酵母 高致病性禽流感病毒 H5N1 HA1 发酵
在10L发酵罐中,对高致病性禽流感病毒H5N1糖蛋白HA1在重组毕赤酵母中的表达发酵工艺进行了研究.通过分批补料培养方法探讨不同培养温度、诱导温度、补料方式、微量元素等因素对菌体的生长以及重组蛋白表达和活性的影响.结果表明,菌种培养和诱导温度均为25℃时,菌体的生长、分泌表达量和与广谱中和抗体的反应活性较好;微量元素是影响重组HA1蛋白生物活性的重要因素;通过优化高密度发酵工艺,H5N1病毒糖蛋白HA1在发酵罐中的表达量比摇瓶培养提高10.5倍,达到约120 mg/L,为大规模制备高致病性禽流感病毒的HA1蛋白奠定了基础.