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红球菌属在生物降解、生物修复、生物转化和生物表面活性剂等领域得到了日益广泛的应用.本研究以红球菌-大肠杆菌穿梭质粒pNV18.1为载体,以腈水合酶为模式酶,研究了大肠杆菌tac、lacZ启动子和红球菌酰胺酶启动子(ami-1/ami-2)在红球菌中的启动效率.结果表明,启动子Ptac、Pami-1(7 bp SD-ATG间隔)、Pami-2(13 bp SD-ATG间隔)和PlacZ在紫红红球菌ATCC 33278中启动表达腈水合酶的比酶活分别是野生菌株的7.5、6.3、5.3和1.8倍,表明这些启动子都可以被红球菌的RNA聚合酶所成功识别.采用PlacZ启动子在红球菌宿主中启动β-半乳糖苷酶报告基因(lacZ),结果表明,lacZ能够在红球菌中高效表达,是优选的红球菌报告基因.

作者:刘昌春;于慧敏;马玉超;潘雯宇;罗晖;沈忠耀

来源:生物工程学报 2009 年 25卷 9期

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作者:
刘昌春;于慧敏;马玉超;潘雯宇;罗晖;沈忠耀
来源:
生物工程学报 2009 年 25卷 9期
标签:
红球菌 启动子启动效率 腈水合酶 报告基因 β-半乳糖苷酶
红球菌属在生物降解、生物修复、生物转化和生物表面活性剂等领域得到了日益广泛的应用.本研究以红球菌-大肠杆菌穿梭质粒pNV18.1为载体,以腈水合酶为模式酶,研究了大肠杆菌tac、lacZ启动子和红球菌酰胺酶启动子(ami-1/ami-2)在红球菌中的启动效率.结果表明,启动子Ptac、Pami-1(7 bp SD-ATG间隔)、Pami-2(13 bp SD-ATG间隔)和PlacZ在紫红红球菌ATCC 33278中启动表达腈水合酶的比酶活分别是野生菌株的7.5、6.3、5.3和1.8倍,表明这些启动子都可以被红球菌的RNA聚合酶所成功识别.采用PlacZ启动子在红球菌宿主中启动β-半乳糖苷酶报告基因(lacZ),结果表明,lacZ能够在红球菌中高效表达,是优选的红球菌报告基因.