脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)在植物抗坏血酸-谷胱甘肽循环中发挥着重要作用.利用同源克隆技术从江南卷柏中克隆到2个脱氢抗坏血酸还原酶基因,分别命名为SmDHAR1和SmDHAR2.SmDHAR1和SmDHAR2分别编码218和241个氨基酸,预测分子量分别是23.97 kDa和27.33 kDa.基因组序列分析显示这2个基因分别含有5和6个内含子.器官表达模式分析发现这2个基因在根、茎、叶中均有表达,是组成型表达基因.在大肠杆菌中表达并纯化了2个基因的重组蛋白.酶活性分析显示SmDHAR1和SmDHAR2蛋白对底物DHA的活性有显著差异,分别是19.76和0.17 μmol/(min·mg).热力学稳定性分析显示这2个重组蛋白的热力学稳定性具有明显差异.因此,基因结构与酶学性质的差异预示着这2个基因可能存在功能上的分化.
作者：成子硕；兰婷；李迪；杨海灵；曾庆银
来源：生物工程学报 2011 年 27卷 1期
