氨基葡萄糖(GlcN)又称氨基葡糖或葡糖胺,是葡萄糖的一个羟基被氨基取代后的化合物,在医药和保健领域具有广泛应用.在前期研究中,我们构建了一株可高效合成GlcN和其乙酰化衍生物N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)的重组大肠肝菌Escherichia coli-glms-gnal(在下游提取过程中用弱酸进行脱乙酰化即可将GlcNAc转化为GlcN).但研究发现,发酵过程中GlcN和GlcNAc能被转运至胞内作为碳源利用,导致胞外产量显著减少.为阻断胞外GlcN和GlcNAc向胞内的转运,利用Red同源重组技术将E.coli-glms-gnal的乙酰氨基葡萄糖磷酸转运子编码基因nagE和甘露糖磷酸转运子编码基因manX敲除,获得nagE基因敲除的工程菌E.coli-glms-gnal-△nagE和nagE/manX基因双敲除的工程菌E.coli-glms-gnal-△nagE-△manX,并在7L发酵罐上利用构建的工程菌进行GlcN和GlcNAc的发酵生产.实验结果表明:培养对照菌株E.coli-glms-gnal 至12h时GlcN产量达到最大值4.06 g/L,GlcNAc产量达到最大值41.46 g/L；而培养单基因敲除菌株E.coli-glms-gnal-△nagE至12h时GlcN产量达到最大值4.38 g/L(是对照菌株的1.08倍),GlcNAc产量达到最大值71.80 g/L(是对照菌株的1.7倍)；培养双基因敲除菌株E.coli-glms-gnal-△nagE-△manX至10h时GlcN产量达到最大值4.82 g/L(是对照菌株的1

作者：陈欣；刘龙；李江华；刘杰；堵国成；陈坚

来源：生物工程学报 2012 年 28卷 3期