昆虫细胞制备AAV-ITR基因表达微载体-临床诊疗知识库

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AAV-ITR基因表达微载体是只含有腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)倒置末端重复序列(Inverted terminal repeats,ITR)、基因表达顺式元件和目的基因,而不合有其他外源DNA序列的双链或单链DNA.本研究利用杆状病毒表达系统,制备得到两种重组杆状病毒Bac-ITR-EGFP和Bac-inrep,并将二者的P3代病毒共同感染昆虫细胞Spodoptera frugiperda (Sf9),抽提小分子量DNA,获得AAV-ITR-EGFP基因表达微载体,2×107的Sf9细胞抽提可以得到100 μg AAV-ITR-EGFP基因表达微载体,核酸电泳显示AAV-ITR-EGFP基因表达微载体主要以单体和二聚体的形式存在.将AAV-ITR-EGFP基因表达微载体通过polyethylenimine (PEI)转染HEK 293T细胞,24 h后荧光显微镜观察有EGFP表达,48 h后达到高峰,转化效率达到65％.

作者：李泰明；潘俊杰；祁静；张春

来源：生物工程学报 2015 年 31卷 8期

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昆虫细胞制备AAV-ITR基因表达微载体

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作者：

李泰明；潘俊杰；祁静；张春

来源：

生物工程学报 2015 年 31卷 8期

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基因治疗基因表达微载体杆状病毒表达系统非病毒载体 gene therapy gene expression mini vector Bac-to-Bac baculovirus expression system non-viral vector

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